PCR产物分析方法
PCR产物分析方法
PCR产物分析检测方法主要有:
(一)直接凝胶电泳:检测有否扩增产物和检测片段大小;
(二)点杂交或夹缝杂交(ASO-PCR):根据与目的片段序列互补的寡核苷酸探针杂交,检测扩增片段之间的序列差异;
(三)酶切分析(PCR-RFLP):根据PCR扩增片段是否存在限制内切酶酶切点及位置不同,用内切酶酶切PCR产物,然后电泳分离检测酶切产物;
(四)PCR-ELISA:修饰一个引物5‘使其带有便于PCR产物固定的功能团,而通过修饰另一引物端5‘使具有便于酶联显色检测的功能基团,达到酶联显色;
(五)多色荧光分析法:用不同荧光颜料标记不同引物的5’端,PCR扩增产物因带有不同的染料呈现不同的荧光颜色,根据颜色区分开来;
(六)PCR-HPLC(高压液想层析)法:PCR产物通过HPLC仪自动分析,7~8min即可显示结果,灵敏度为0.3ng。
(七)毛细管电泳:检测有否扩增产物和片段大小。