细胞STR分型鉴定
细胞实验革命——细胞STR鉴定
您是否正面临着这样的问题……
SCI 论文发表 (请提供 ATCC要求细胞STR鉴定图谱)
在科学研究结束之际,待投稿的杂志要求提供细胞STR分型鉴定结果,而此时细胞是否被污染则决定了您几个月甚至长达几年的科学研究的成败。
您是否有过这样的疑问……
新得到的细胞 实验室传5代以上的细胞 贮存于超低温冰箱几年的细胞
污染了么? 鉴定正确么?会影响实验结果么?
标准的制定:
2011年初,美国菌种保藏中心(ATCC)制定了人源细胞系STR分型鉴定标准,旨在约束因细胞交叉污染和错误辨识所导致的无效科研数据的不断扩增。更重要的是,细胞系的精确鉴定在研发基于细胞水平实验的医学产品时起到至关重要的作用,它能避免将错误细胞当成正确的目的细胞而进行的系列实验的风险。
方法的选择:
在过去的45年里,虽然科研工作者使用各种各样的传统方法来鉴定细胞,但细胞交叉污染的问题却有增无减。据报道,国外15-25%的研究论文因为使用了被错误辨识和交叉污染的细胞而导致错误的结论。这造成数以百万美元的研究经费的浪费,并产生了大量的无效数据。而在国内,这一比率将会更大。
因此,利用STR分型来鉴定人源细胞系的方法应运而生!
STR分型是一种用来做亲缘分析的方法,它的原理是在一单管中同时扩增多个多态性DNA片段。STR位点是由不同数目重复单元组成的重复DNA序列。每一个STR位点均能被扩增且扩增产物标记上不同颜色的荧光,使得扩增产物很容易通过片段大小和颜色来区分。
STR分型的优势:
STR分型快速、经济、易于自动化,能得到明确可重复的数据,且数据格式适合建立一个标准参考数据库。而这些优点,也使STR分型成为ATCC制定细胞鉴定标准的指定方法!
· 高度丰富信息,同时分析超过多个STR基因座,可以准确判断细胞交叉污染和细胞类型。
· 高灵敏度,可以检测最低至0.1ng DNA(约15个二倍体基因组),微量污染也可检测。
· ATCC细胞库或其他细胞库若有有相应细胞STR分型数据,可与之比对得出所检细胞系的名称。
细胞鉴定流程:
→ 细胞DNA提取
→ DNA定量
→ 多色荧光体系复合扩增ABI 9700 Thermal Cycler
→ DNA片段分离和荧光信号检测ABI 3130 Genetic Analyzer
→ 数据处理得到基因分析和图谱 GeneMapper v3.2 Software
→ 与数据库对比和结果分析
华科基因——国内细胞STR分型鉴定的先行者!
华科鉴联基因科技与国内多个权威细胞中心展开长期紧密的合作,坚持致力于细胞交叉污染鉴定工作的研究,在细胞STR分型鉴定方面具有丰富的经验。目前已为国内近百所高校、科研院所及数十家三甲医院服务,并为多家疫苗生产企业、CRO企业提供细胞STR分型鉴定服务。
我们提供的服务:
STR数目
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荧光标记种类
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遗传信息量
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基因座兼容性
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16
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4
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+++
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ATCC STR database+CODIS
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20
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5
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+++++
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以上全部 + 4个高度多态性位点
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样本要求:
1. 可提供DNA 样本或细胞,加冰袋运输;同时请注明细胞数量或DNA含量,DNA 含量最好大于20ng/μl,体积大于20μl。如提供细胞,请提供PBS细胞悬浮液,离心沉淀,去上清液,可常温特快专递运输(京外地区建议方法);细胞数量≥106个。
联系方式:
Tel :010-57253085 15901412183
Email: hkgene@163.com